農委會動植物防疫檢疫局新竹分局植物檢疫課 劉逸琪

成果摘要

薊馬屬（Thrips sp.）為纓翅目（Thysanoptera）錐尾亞目（Terebrantia）中最大一屬，世界紀錄約250種，多數為農作物害蟲，亦為進口植物檢疫截獲害蟲頻率最高的種類。本屬薊馬體色多態且體形相似，成蟲及幼蟲時期均不易鑑定，在檢疫鑑定上面臨極大的困難。本研究之目的在嘗試應用分子生物技術，分析核糖體DNA（ribosomal DNA）之內轉錄間區間序列（internal transcribed spacer 2 region sequence，簡稱ITS2 region）並建立分子診斷標誌，以解決薊馬屬害蟲鑑定所面臨的難題。本文應用核糖體DNA（rDNA）之內轉錄區間序列（ITS2 region sequence）分析薊馬屬中經濟為害嚴重且臨場檢疫檢出頻率最高之四個種，分別為蔥薊馬（Thrips babaci (Lindeman)）、南黃薊馬（T. palmi (Karny)）、玫瑰花薊馬（T. fuscipennis (Haliday)）及澳洲薊馬（T. australis (Bagnall)）。其生物資訊與已發表於NCBI基因庫之薊馬屬經DNASTAR分析軟體進行核甘酸序列比對分析，結果顯示除花薊馬（T. hawiiensis）與花色薊馬（T. coloratus）外，不同種薊馬間ITS2區間序列相似值及差異值有極大分岐。根據已知序列設計出可清楚區別上述四種重要害蟲之種專一性引子，測試結果顯示確實可由標的害蟲產生專一性DNA片段。搭配多套式聚合酵素鏈鎖反應（multiplex- PCR）及聚合酵素鏈鎖反應-限制酵素圖譜（polrmerase chain reaction- Restriction fragment length polymorphism，簡稱PCR- RFLP）等方法進行薊馬屬害蟲分子鑑定，應可達到準確且快速鑑定之目的。